An indirect hemagglutination test for a seroepidemiological survey of Streptococcus pyogenes infection was standardized. This is an improved modification of the indirect hemagglutination test which utilizes an unstable reagent prepared with fresh blood cells. Two types of bacterial antigens represented by extracellular products and purified streptolysin O were assayed, but only the former antigen gave good results. Pretreatment of the bacterial antigen with 0.15 M NaOH and neutralization to pH 5.5, as well as postfixation of sensitized red cells with 0.1% glutaraldehyde at 56oC for 30 min were found to be essential to give long stability to the reagent in liquid suspension, at least 9 months at 4oC. A total of 564 serum samples with high, moderate and low anti-streptolysin O antibodies as determined by the neutralization assay were studied by the indirect hemagglutination test using the new reagent. The sensitivity, specificity, efficiency, positive predictive value and negative predictive value of the test in relation to the neutralization assay were 0.950, 0.975, 0.963, 0.973, and 0.955, respectively. The kappa agreement index between the two techniques was high (0.926) and ranked as "almost perfect". Antibody levels detected by both techniques also presented a high positive correlation (rs = 0.726). Five reagent batches successively produced proved to be reproducible. Thus, the improved indirect hemagglutination test seems to be useful for public health laboratories.

Identificação de antígenos de Toxoplasma gondii envolvidos nas reações de hemaglutinação passiva IgM e IgG destinadas ao sorodiagnóstico da toxoplasmose Extratos brutos de Toxoplasma gondii constituem matéria prima antigênica para o preparo de reagentes empregados em diferentes testes sorológicos para o diagnóstico da toxoplasmose, incluindo entre estes as reações de hemaglutinação indireta para a detecção de anticorpos IgM (HA IgM) e IgG (HA IgG). Até o presente momento, moléculas antigênicas do parasita que realmente estão envolvidas na interação com anticorpos aglutinantes, anti-T. gondii, não são ainda bem conhecidas. O processo de absorção de soros de pacientes com toxoplasmose, utilizando o reagente de HA IgG (HA-toxo-G), possibilitou a demonstração de que hemácias deste reagente estavam sensibilizadas com antígeno do parasita associado às bandas de massa molecular relativa de 39, 35, 30, 27, 22 e 14 kDa. O processo de imunoabsorção com o reagente de HA IgM (HA-toxo-M) por sua vez forneceu eluatos de anticorpos, que reconheceram bandas antigênicas correspondendo a 54, 35 e 30 kDa, indicando a existência destes antígenos ligados às hemácias do reagente. A identificação de antígenos mais relevantes para cada tipo de reagente de hemaglutinação poderá prestar auxílio na inspeção da matéria prima antigênica, assim como das partidas de reagentes produzidas rotineiramente. Ademais, os achados fornecem subsídios para introduzir novas modificações nestes reagentes, objetivando a melhoria no desempenho dos testes de HA para o diagnóstico da toxoplasmose

Crude Toxoplasma gondii antigens represent raw material used to prepare reagents to be employed in different serologic tests for the diagnosis of toxoplasmosis, including the IgM and IgG indirect hemagglutination (IgG-HA and IgM-HA) tests. So far, the actual antigenic molecules of the parasite involved in the interaction with agglutinating anti-T. gondii antibodies in these tests are unknown. The absorption process of serum samples from toxoplasmosis patients with the IgG-HA reagent (G-toxo-HA) demonstrated that red cells from this reagent were coated with T. gondii antigens with Mr of 39, 35, 30, 27, 22 and 14 kDa. The immune-absorption process with the IgM-HA reagent (M-toxo-HA), in turn, provided antibody eluates which recognized antigenic bands of the parasite corresponding to Mr of 54, 35 and 30 kDa, implying that these antigens are coating red cells from this reagent. The identification of most relevant antigens for each type of HA reagent seems to be useful for the inspection of the raw antigenic material, as well as of reagent batches routinely produced. Moreover the present findings can be used to modify these reagents in order to improve the performance of HA tests for the diagnosis of toxoplasmosis

Devido à escassez de dados epidemiológicos sobre esquistossomose mansônica onde Biomphalaria tenagophila é vetor foi desenvolvido em 1980 o presente trabalho, no município paulista de Pedro de Toledo. Foram examinadas fezes de 4741 pessoas (Método de Kato-Katz) com prevalência de 22,8%; entre essas, 583 foram tratadas para a endemia anteriormente e 4158 não medicadas; as prevalências nos dois grupos for ram, respectivamente, 31,7% e 21,6%. Por investigação epidemiológica constatou-se que 83,6% dos casos foram autóctones da área estudada. Prevalência dos autóctones e intensidade de infecção nos portadores autóctones não tratados foram maiores no homem do que na mulher; a intensidade no último grupo foi baixa: 58,5 ovos/ g de fezes (média geométrica). De acordo com grupos etários, se correlacionaram bem (r s = 0,745) as intensidades de infecção e as prevalências. A infecção ocorreu, na zona rural, principalmente, durante lazer e trabalho doméstico. Somente 0,4% de 1137 moluscos foram positivos para Schistosoma mansoni. Esse índice foi, aparentemente, o mesmo em estudo de 1978 quando a prevalência humana era de 12,0%. A área estudada apresentou diferenças e semelhanças epidemiológicas em relação às áreas onde B. glabrata é o principal hospedeiro intermediário.

Due to the scarce information about the epidemiological features of schistosomiasis in which the vector is Biomphalaria tenagophila, an investigation was carried in Pedro de Toledo in 1980 where such peculiarity is observed. Stool examinations (Kato-Katz method) were performed in 4,741 individuals (22.8% positive to Schistosoma mansoni eggs) of this 583 had previously received chemoterapy and 4,158 remainders, untreated. The schistosomiasis prevalence in those two groups where respectively 31.7% and 21.6%. Epidemiological investigation showed that 83.6% were autochthonous cases from the studied area: the autochthonous prevalence rate, and the intensity of infection in the untreated autochthonous cases were higher in males than in females; the intensity in the latter untreated group was low, 58.5 eggs/g feces (geometric mean). Moreover, according to the age groups the intensity of infections correlated well (r s = 0.745) with the prevalence rates. Schistosomiasis was verified to occur mostly during the leisure time and by the use of water streams for housework in rural zone. Only 0.4% out of 1,137 snails was positive for S. mansoni cercariae, apparently unchanged from the 1978 study when the human prevalence was 12.0%. The studied area presented differences and similarities in relation to the other Brazilian areas were the main intermediate host is B. glabrata.

Lectinas foram marcadas com fluoresceína e testadas na reação de imunofluorescência para a detecção de anticorpos anti-T. gondii, no diagnóstico da toxoplasmose aguda. Neste estudo tentou-se encontrar reagentes alternativos para conjugados fluorescentes anti-IgM humano (CFAIgMH), que com freqüência contém anticorpos antitoxoplasma, como contaminantes, devido às infecções naturais por T. gondii, entre os animais utilizados para imunização. Conjugados fluorescentes de lectina de lentilha (CFL) (Lens culinaris) forneceram resultados satisfatórios. Avaliação do CFL efetuada em total de 179 amostras de soros de pacientes com toxoplasmose aguda e crônica, com infecções não relacionadas e de indivíduos sadios, mostrou valores altos nos índices de eficiência relativa, co-positividade e co-negatividade, respectivamente de 0,989, 0,969 e 1,000, em relação ao CFAIgMH convencional. Além disso, três partidas de CFL preparadas sucessivamente forneceram resultados reprodutíveis. A vantagem de se empregar o LFC como reagente alternativo no diagnóstico sorológico da toxoplasmose aguda consiste nos aspectos práticos da sua preparação.

Lectins were labeled with fluorescein and tried as conjugates in the immunofluorescence (IP) test for the detection of IgM antibodies to T. gondii, in the diagnosis of acute toxoplasmosis. This approach was an attempt to find alternative reagents for anti-human IgM fluorescent conjugates (AHIgMFC), which contain quite frequently anaibcdies to toxoplasma, as contaminants, due to natural T. gondii infections among animals used for imunization. Lentil (Lens culinaris) lectin fluorescence conjugates (LcFC) provided most satisfactory results. The evaluation of LcFC carried out in a total of 179 sera from patients with acute and chronic toxoplasmosis, with non-related infections or healthy subjects, gave high values of relative efficiency, co-positivity and co-negativity indices, respectively 0.989, 0.969 and 1.000, in reference to the conventional AHIgMFC. Moreover, three batches of LcFC successively prepared gave reproducible test results. The advantage of LcFC as an alternative reagent for the serodiagnosis of acute toxoplasmosis is supported by practical aspects of its preparation.